• 技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 琥珀酸(SUCN)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

    琥珀酸(SUCN)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

    更新時間:2023-11-07   點擊次數:96次

    琥珀酸(SUCN)酶聯免疫分析(ELISA試劑盒使用說明書

    本試劑盒僅供研究使用。   

    使用目的:

    本試劑盒用于測定樣本中琥珀酸(SUCN的含量。

    實驗原理

    本試劑盒應用酶聯免疫競爭法測定標本琥珀酸(SUCN水平。用純化的琥珀酸(SUCN抗體包被微孔板,制成固相體,往包被單抗的微孔中加入琥珀酸(SUCN),和HRP標記的琥珀酸(SUCN抗原,使它們競爭結合,,經過che底洗滌后底物TMB顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的琥珀酸(SUCN)的含量相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品琥珀酸(SUCN的含量。  

    試劑盒組成

    1

    30倍濃縮洗滌液

    20ml×1

     

     

    8

    標準品S1400ng/L

    0.5ml×1

    2

    酶標試劑

    6ml×1

    標準品S2200ng/L

    0.5ml×1

    3

    酶標包被板

    12×8

    標準品S3100ng/L

    0.5ml×1

    4

    顯色劑A

    6ml×1

    標準品S450ng/L

    0.5ml×1

    5

    顯色劑B

    6ml×1

    標準品S525ng/L

    0.5ml×1  

    6

    終止液

    6ml×1/

    9

    說明書

    1

    7

    樣品稀釋液

    6ml×1/

    10

    封板膜

    2

     

    標本要求 

    1.標本處理:(1)水樣   采集后經 -20℃反復凍融三次,再經玻璃纖維過濾后,備查

    2)組織   樣品用丁醇:甲醇:水(52570 V:V:V)抽提,或按相關文獻提取進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,備查

    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

    操作步驟

     

    1. 加樣:分別設標準孔、空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上標準孔中加50微升,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

    2. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。   

    4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

    6. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

    7. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

    8. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

     

    計算

      以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

    注意事項

    1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

    2濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

    3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

    4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

    5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

    6.底物請避光保存。

    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

    9.本試劑不同批號組分不得混用。

    檢測范圍:

    10ng/L-500ng/L

    規格:

    96/

    保存條件及有效期

    1試劑盒保存:;2-8。

    2.有效期:6個月





    c国产又粗又猛又爽又黄的视频,熟妇人妻系列AV无码一区二区,韩国av片永久免费,播色屋97超碰在人人